1.试剂盒反应体系配制
反应体系A
（1）模板DNA（质粒或PCR产物） 约500-1000ng 7ul
（2）Random Primer 1500ng/ul 4μl
（3）ddH2O Total：14ul
反应条件：95℃ 20 min 变性模板； 4℃ 5min
反应体系B
（1）10X Ramdom buffer(100mM Tri-HCl,pH7.5, 70mM MgCl2, DTT 1mM) 2μl
(2) 5X dNTP (TAMRA－dUTP，FITC-dUTP,Cy3-dUTP,Cy5-dUTP or DIG-dUTP) 4μl
(3) Klenow 酶 （40U/ul） 2μl
(4)无酶H2O 补齐：20ul
2.将反应体系A加入上述反应液B:
37℃ 2h；标记反应。灭活反应65℃ 10min；冷却冰中备用。
3.沉淀探针除去未结合的核苷酸:
含20µl探针离心管里加10µl Cot-1 DNA（1μg/μl），1/10体积的3M NaAC, pH＝5.2,2倍体积的100% 乙醇。置于 -80℃ 15 min或者-20℃ 至少30 min。4℃， 13,000 rpm 离心20 min，完全弃掉上清。
4.悬浮探针：用4µl无菌水悬浮沉淀，加入杂交混合液16µl,备用。
备注：试剂盒货号：SJYW-01，SJYW-02，SJYW-03，SJYW-04，SJYW-05（不同标记dUTP）；规格20T；价格：1500元。
TAMRA－dUTP，FITC-dUTP,Cy3-dUTP,Cy5-dUTP一般用于FISH实验，Bio-dUTP 和DIG-dUTP 一般用于Northern等。
