活细胞红色荧光示踪探针

（1）产品内容：

名称：活细胞染色示踪-红色，货号：CM1912   规格：0.1ml

（2）检测原理：

PKH26是一种脂溶性荧光染料，能插入细胞膜的脂质分子牢固结合，用于标记活细胞的膜结构。在细胞分裂时，PKH26荧光会平均分配到两个子细胞; 荧光强度会随着分裂次数而递减。PKH26标记的细胞具有高稳定性和低毒性，适用于体外和体内长期示踪实验。与CFSE类似（绿色荧光），PKH26红色荧光。

（3）具体应用：

流式细胞术分析细胞的增殖分裂，细胞染色后的示踪或追踪，细胞的相互作用（绿色/红色）。

（4）试剂盒特点与保存条件

Ø  所有试剂2-6℃保存; 试剂盒在有效期内的稳定。不要使用已经过期的试剂;

Ø  用前，将试剂恢复至室温（20-25℃），探针溶液必须混匀; 应带手套操作，使用新鲜二甲苯乙醇溶液

Ø  试剂PKH26浓度：2.5μM， 0.1ml， 1000×。

（4）检测步骤

Ø  在室温或37℃下，用PBS稀释（1:1000比例）的染料，通过涡旋混匀即可。比如配制1ml溶液（利用PBS，1:1000稀释原液）。

Ø  将其与离心沉淀的细胞一起，37℃孵育15-20分钟，再在2-8℃放置15分钟，离心细胞，PBS洗涤去除染料工作溶液，根据具体实验，继续培养或与其他细胞混合观察或将染色的细胞与其他细胞共培养，避光。根据实际情况培养一段时间，一般不超过10天。

Ø  洗涤后，使用激发波长为 550nm，发射波长565nm（FL1或FITC通道）的流式细胞仪或荧光显微镜进行分析。

注意：使用原液;将任何剩余的溶液等分存于-20℃。避免反复冻融循环，避免光照。

 

活细胞绿色荧光示踪探针

（1）产品内容：

名称：活细胞染色液示踪或分裂增殖探针，货号：CM1911   规格：0.1ml

（2）检测原理：

活细胞荧光示踪探针CFSE，可以应用荧光显微镜和流式细胞仪检测荧光染色，分析异质细胞群的有力工具。在所有现有的荧光染料中，CFSE是非荧光分子，其扩散到细胞中并被细胞内非特异性酯酶水解以产生荧光产物。荧光产物仅在具有完整细胞膜和活性酯酶活性的细胞中产生，而死细胞不被染色。能追踪细胞的去向和分裂，其荧光被检测的时间大约持续10-12天左右，荧光强度随细胞分裂而减少。

（3）具体应用：

流式细胞术分析细胞的增殖分裂，细胞染色后的示踪或追踪。

（4）试剂盒特点与保存条件

Ø  所有试剂2-6℃保存; 试剂盒在有效期内的稳定。不要使用已经过期的试剂;

Ø  用前，将试剂恢复至室温（20-25℃），探针溶液必须混匀; 应带手套操作，使用新鲜二甲苯乙醇溶液

Ø  试剂CFSE浓度，：2.5μM， 0.1ml， 1000X。

（5）检测步骤

Ø  在室温或37℃下，用PBS稀释（1:1000比例）的染料，通过涡旋混匀即可。比如配制1ml溶液（利用PBS，1:1000稀释原液）。

Ø  将其与细胞一起孵育10到30分钟，PBS洗涤去除染料工作溶液，根据具体实验，与其他细胞混合观察，或者，将染色的细胞与其他细胞共培养，避光。根据实际情况培养一段时间，一般不超过10天。

Ø  洗涤后，使用激发波长为 490左右（FL1或FITC通道）的流式细胞仪或荧光显微镜进行分析。

注意：使用原液;将任何剩余的溶液等分存于-20℃。避免反复冻融循环，避免光照。

 

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