名称：DCFH-DA ROS染色 货号：001.160404 规格：100µL 浓度：10mM
储存与运输：2-8℃
实验步骤
（1）原理和适用：
细胞内活性氧（ROS）增加可以触发一系列涉及细胞存活和凋亡的细胞信号通路。ROS测量结果对于解释信号通路至关重要。本试剂适用于贴壁细胞或悬浮细胞的DCFH-DA染色ROS：适用于在多孔板中培养的细胞或悬浮培养管中，可用于荧光显微镜或荧光检测分析设备或荧光酶标仪。
（2）材料准备：
1）磷酸盐缓冲液（PBS）
2）阳性对照（例如，100 μM H₂O₂或其他活性氧诱导物）
3）阴性对照（未处理细胞）
4）冰箱取出试剂，室温放置平衡5分钟
（3）操作步骤：
1）细胞接种：将贴壁细胞接种于合适的多孔板中，达到70-80%的融合度。
DCFH-DA工作液的制备：将10 mM DCFH-DA储备液1000倍稀释。可以用预热的无血清培养基，轻轻涡旋混匀。
2）加入细胞反应：去除细胞培养基。用室温的 PBS 洗涤细胞1次。向每个孔中加入 DCFH-DA 工作液，在 37°C 下避光孵育 20-30 分钟。
3）洗涤：去除 DCFH-DA 工作液。用 PBS 洗涤细胞两次，此步骤以去除任何细胞外探针。3）处理：加入用无血清培养基或 PBS 稀释的DCFH-DA或对照。
4）数据采集：荧光显微镜：使用激发/发射波长约为（485/535 nm）的荧光显微镜对细胞成像。或采用荧光酶标仪：使用微孔板读数仪在激发波长 485 nm、发射波长 535 nm 下测量荧光强度。
（4）实验操作注意基本的戴手套，穿白大衣，防止污染，通风等。
（5）其他细胞，如悬浮细胞，步骤类似，如果遇到问题请联系我们。
Tel:020-89895006 180-1199-7127(值班手机)
下一篇：没有了!
