原位滚环扩增检测技术试剂盒

1.实验原理

本技术属于原位核酸检测原理技术之一，核酸滚环复制是一种特殊的DNA单链复制技术方法，常见于病毒、质粒、环状DNA，miRNA、mRNA、lncRNA或相差几个碱基德mRNA原位检测。其核心原理可以概括为“边滚动，边合成核酸，后续荧光检测信号”。

2.具体过程

（1）设计环状探针与目的基因片段结合，中间突变位置设计不同探针；

（2）磷酸链接酶在环状寡核苷酸探针的暴露3’和5’端链接起来；

（3）在引物条件下，开始对环状探针扩增，开始合成新的DNA链，随着新链合成，引物的5’端被不断“顶”出来，像从毛线球中拉出一根不断重复的线。

（4）扩增德单链，数量不断增多，再用带荧光德探针去检测扩增的环状单链片段。

3.试剂盒组成：

（1）订制探针：1）环形探针Probe1 2）扩增引物Primer 3）检测探针Probe2

（2）试剂盒其他内容：

1）磷酸连接酶，2）扩增体系Buffer，3）原位检测Buffer，4）洗涤液，

5）DAPI抗荧光淬灭剂封片剂。

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