染色体显带技术常用的有荧光Q-带、Giemsa G-带、异染色质的C-带等。这里介绍较为常的Giensa G -带C-带技术。

1. G-显带染色体标本的制备

方法一：

（1）将配制好的0.25%的胰蛋白酶溶液60毫升倒入立式染色缸内，37℃水溶预热，用3% Tris调pH=7

（2）将标本片浸入胰酶溶液中，不断轻轻摆动，新鲜标本只需处理3-9秒钟，老标本则需处理3-5分钟。

（3）立即投入1：10或1：20的Giemsa工作液，染色15-20分钟

（4）自来水冲净，气干。

方法二：

（1）45毫升生理盐水或双蒸水倒入立式染色缸内，加入已配好的2%胰酶液5毫升，用3% Tris溶液调pH=7于37℃预热。

（2）把染色体标本片浸入37℃上述胰酶工作液中，略加摇动，处理30秒左右。

（3）取出后立即用1：10Giemsa工作液染色8-10分钟，自来水冲净。

注意事项

①胰酶的品质会直接影响显带的质量，购买品牌试剂较保险。

②胰酶的活性与pH值和温度有关，在pH=7温度37℃状态下，胰酶活性最高。

③胰酶处理时间长短与标本片片龄有关，新鲜的标本处理时间短，且带纹较清晰，建议标本片的片龄在2-7天内较适宜。

④Giemsa工作液要现用现配

⑤胰酶工作液长时间置37℃水浴，容易浑浊污染，应弃之。

2. C-带染色体标本的制备

C显带特点：对染色体中的结构性异染色质容易染色，对常染色质只能显示较淡的轮廓。

C显带所显示着较深的结构部位：

①各染色体的着丝粒；

②各近端着丝粒的部位；

③在1、9、16号染色体具有次缢痕的位置上；

④Y染色体的长臂远端，此部分系Y染色质部分。其它部分着色很淡。

核型分析过程，对某些染色体变异问题，往往需要C显带技术与G显带技术结合分析，更能准确判断染色体、体的畸变。

方法一：

（1）将常规制备染色体标本片放入0.2NHCL溶液中，室温下，处理15-30分钟；

（2）自来水冲净后，再将标本片浸入预温到65℃的5% Ba(OH)2溶液中，处理10分钟；

（3）自来水冲净后，再把标本片投入预温到65℃的2×SSC溶液中，处理1-1.5小时；

（4）自来水冲净后，用1：10 Giemsa工作液染色0.5-1小时；

（5）自来水冲净，气干。

方法二：

（1）将制好的标本片放入0.2N HCL中，室温下1小时；

（2）水洗净（均用自来水冲洗）；

（3）浸入1% Ba(OH)2水溶液中，温度预热到50℃，处理时间15-20秒；

（4）水洗净

（5）浸入预温到60℃的2×SSC溶液中，处理90分钟。

（6）用水彻底冲净；

（7）1：10 Giemsa染色液染色10-15分钟

（8）水冲净、气干。

注意事项

①标本片年龄不能超过一个月；

②各种处理溶液一定要达到所需的温度时，才放入表本片进行处理；

③每一步处理后，要立即用自来水彻底冲净后，才进行下一步处理。

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