外显子生物蛋白标记试剂盒问答(V3)
1.你们提供蛋白、抗体、荧光标记吗?有几种荧光标记方法?
答:两种,一种是氨基偶联方法试的剂盒,染料含有琥珀酰乙酯(SE)或四氟苯基酯部分,可与蛋白质的伯胺有效反应形成稳定共轭。另外一种方法是采用快速抗体荧光标记试剂盒。
前者需要去除氨基溶液和BSA等杂质,时间10小时。后者不需要去除氨基溶液,时间2-4小时。规格均是5人份。但后者不适合少部分蛋白。
2.蛋白质标记试剂盒的荧光有哪些?
答:天蓝(DEAC),荧光素,FITC,EF488,Cy3,Cy5,Cy7,Cy3.5,Cy5.5,罗丹明,德克萨斯红等。
3.对抗体的量和分子量大小有要求吗?
答:试剂盒经过优化,每次反应可标记10ug-1mg IgG抗体和相当数量的其他抗体
或蛋白质,其分子量必须大于25 kDa。
4.对抗体溶液和pH值有要求吗?
答:对pH值在4到10缓冲液抗体,均可以标记。
5.标记荧光的抗体,可用于哪些应用?
答:免疫荧光,流式细胞术,Western blotting, ELISA,FISH共定位,免疫蛋白共定位。但是,有些与抗体本身有关。因此,不能确保100%有效。如果标记失败,按照35%费用。
6.蛋白或抗体荧光有什么注意事项?
答:为得到较好标记效率,所标记的抗体或蛋白质必须不含伯胺。通过透析或其他方法,我们可以协助您解决。不纯的蛋白质,例如粗血清、粗制备的抗体将不能很好地标记。值得注意的是在低浓度叠氮化钠或硫柳汞(≤1 mM)不会干扰反应。所标记蛋白或抗体IgG溶液应该大于2 mg/mL,低于该浓度需要浓缩。其次,抗体和蛋白纯化的过程不完全一样,具体问题具体分析或咨询我们focobio@126.com。
7.能否提供标记说明书?
答:如下。
荧光标记抗体试剂盒(001)具体步骤:
(1) 取出试剂盒内的碳酸氢钠溶液(1M,pH9.0),室温备用。
(2) 如果蛋白质浓度大于2mg /mL,则蛋白质应在适当的缓冲液中稀释至2毫克/毫升(如PBS或0.1 M碳酸氢钠。
(3)在0.2-0.5 mL的2mg /mL蛋白溶液中,加入1/10体积(20-50 μL)的1 M碳酸氢盐。
(4)取出染料加热到室温平衡,将蛋白质溶液加到反应瓶中染料。均匀混合使染料完全溶解。搅拌反应混合物室温下1小时。
(5)纯化:取出纯化柱,离心1分钟,丢弃离心液,加入抗体,再离心1分钟,获得抗体。
荧光标记抗体试剂盒(002)具体步骤:
(1)取出试剂盒内的荧光标记试剂管,3分钟室温平衡备用。
(2) 蛋白质或抗体缓冲液要求不严格,甚至有甘油均可,用试剂盒提供的稀释液试剂管稀释至100uL,如抗体是30uL,加入稀释液70uL。
(3)将荧光标记试剂管,加入到2步骤康体内,室温1-2小时。
(4)纯化:取出试剂盒纯化柱,离心1分钟,丢弃离心液,加入抗体,重复离心,获得抗体。
如果您在标记中或使用产品中,有任何疑问,请联系我们 focobio@126.com
附产品信息
Cat. |
Name |
Size |
Price |
Storage |
001.901 |
荧光标记抗体试剂盒-001 |
10T |
950元 |
2-8℃ |
001.092 |
荧光标记抗体试剂盒-002 |
10T |
950元 |
2-8℃ |
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