Cat: CE001 Store：-20℃ Size：100T Price：310
产品介绍：
碱性磷酸酶(ALP)在碱性环境中催化磷酸酯的水解,会导致自由基和无机磷酸盐的形成。在哺乳动物中，ALP酶主要存在于肝脏、骨骼和肾脏中。血清ALP水平显著升高，称为高碱性磷酸酶血症，该变化与恶性胆道梗阻、原发性胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎、肝淋巴瘤和结节病相关。
本试剂盒适用于科学研究和药物开发。碱性磷酸酶检测试剂盒可直接测定血液、尿液等其他生物样品中的ALP活性，无需预处理。利用ALP水解对硝基苯基磷酸，生成淡黄色产品，在波长405 nm有最大吸光度。分光光度变化的反应速率与酶活性成正比。该测定方法检出最低为2U/L, 线性范围可达800 U/L，当样品ALP活性超过800 U/L时，用PBS稀释样品，结果乘以稀释倍数。对于ALP活性低的样品，培养时间可延长至4 min以上。参考值ALP活性(U/L)人血清为12.4土2，大鼠血清为190+2.0,羊血清为202.8+4.5.
产品适用：
本试剂盒适用于血清、血浆、唾液、骨髓等碱性磷酸酶活性的检测。
试剂盒组分：250T
（1）检测缓冲液(pH 10.5) 50 mL
（2）醋酸镁 (0.2 M) 1.5 mL
（3）pNPP 底物 (1 M) 600μl
（4）校准剂柠檬黄 10 mL
所需的设备：移液枪，荧光仪或酶标仪、透明平底96孔板、1.5 mL离心管、磷酸盐缓冲盐水(PBS)、Triton-100，可以在96孔板中进行检测，
样品前期处理：
（1）ALP在4℃可稳定48小时，在20℃可稳定2个月。
（2）EDTA,草酸盐，氟化物和柠檬酸盐是已知的ALP抑制剂，在样品制备中应避免使用。
（3）血清、血浆(不含EDTA/柠檬酸盐，理想情况下为未溶血)和细胞培养基可直接测定。
（4）细胞裂解物：105细胞PBS洗涤，溶解在0.5 mL 0.2% Triton X-100，孵育20分钟。
（5）将5~50μl样品转移到透明平底96孔板的适当孔中。
工作试剂的制备：
（1）试剂：分析缓：200 uL + 醋酸镁 (0.2 M) ：5μL + pNPP液体(1 M) 2μL；
（2）将200 μ纯净水(空白组)和200 μ Calibrator分别转入96孔板的不同组中；
（3）移管150 ~ 195 uL工作试剂到样品孔。样品孔的最终反应容积应为200 uL；
（4）轻轻拍打盘子搅拌。
（5）立即在405nm处利用酶标仪读取光密度，4分钟后在酶标机上再次读取。
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